5.1要求

5.1.1天平
5.1.2脫水介質
5.1.3高壓滅菌器
5.1.4層流氣流
5.1.5玻璃器皿

5.2培養基的準備（使用脫水培養基）

5.2.1將脫水后的介質黑暗包裝或按照制造商的指示密封包裝。
5.2.2稱取所需量的脫水培養基，然后將其加入裝有純凈水的燒瓶中。
5.2.3用純凈水補足所需的體積。
5.2.4在滅菌前和滅菌后檢查培養基的pH值，如果需要，請按照相應培養基容器中所述的HCl或NaOH溶液，按照相應培養基容器中所述調整pH值。
5.2.5根據需要將介質分配到燒瓶或試管中。
5.2.6用耐高溫高壓塑料蓋/棉塞蓋住燒瓶和試管，并用黃油紙/鋁箔紙包裹。按照步驟中提到的步驟加載材料高壓滅菌器操作的SOP。
5.2.7除非另有說明，否則可通過在15磅壓力下于121°C高壓滅菌15分鐘來滅菌介質。
5.2.8在“媒體準備注冊”中輸入準備好的媒體的詳細信息。
5.2.9還要在SOP（高壓滅菌器的操作）的高壓滅菌器滅菌記錄中進行相關輸入。
5.2.10將培養基在30至35°C的溫度下預孵育48小時。
5.2.11如果是液體培養基，則目視檢查是否有渾濁形式的增長；如果是固體瓊脂，則目視檢查是否存在濁度的增長。如果發現有任何增長，請丟棄介質。
5.2.12對每份滅菌培養基進行陽性對照試驗。
5.2.13在低于25°C的溫度下預溫育15天后，將制備的無菌固體瓊脂和液體培養基保存。

5.3傾盤的準備

5.3.1給培養基補水并按照培養基準備說明進行滅菌。
5.3.2將介質冷卻至45°以下，并在無菌條件下將15 – 20 ml倒入無菌Petri板（直徑9至10 cm）中。培養皿的底部應標有培養基名稱的詳細信息，批號。和準備日期。
5.3.2凝固并翻轉培養皿。將板在30°C至35°C下孵育48小時。
5.3.4目視檢查是否有污染。如有必要，丟棄。

5.4斜and的準備

5.4.1給培養基補水后，溶解瓊脂培養基。
5.4.2在18 x 150毫米試管中分配約10毫升。用不吸水的棉花塞住試管，并用黃油紙覆蓋。
5.4.3按照標簽上的培養基準備說明進行滅菌。
5.4.4從高壓滅菌器中取出試管并將其置于傾斜位置以使其傾斜，然后將試管放置在用于Butts的試管架中。
5.4.5確保傾斜的頂部不接觸棉塞并使其凝固。
5.4.6在適當的溫度下預孵育48小時。
5.4.7目視檢查是否有污染。如有必要，丟棄。
5.4.8在試管上適當標記介質名稱，批號和制備日期。
5.4.9在低于25°C的溫度下進行預孵育后，請保存斜面。

5.5準備RODAC板

5.5.1給培養基補水并按照培養基制備說明進行滅菌。
5.5.2冷卻培養基，并在無菌條件下倒入無菌RODAC板中。RODAC板的底部應標明介質名稱，批號，制備日期等詳細信息。

5.6培養基/滅菌負荷號的可追溯性

5.6.1每批準備和滅菌的培養基都分配有一個特定的批號，為8個字符，如下所示。
XX-YYZZM
XX：表示序列號 所準備媒體的
格式YY：表示月份
ZZ：表示年份
M：表示媒體的縮寫。
5.6.2所有準備/滅菌的培養基批次應按月順序編號。在分析數據表中記錄
用于微生物檢測的培養基名稱和所有培養基的特定批號。
5.6.3陽性對照
枯草芽孢桿菌NCIM 2063（或等效物）的
微生物白色念珠菌NCIM 3471（或等效物）
對于差異培養基和選擇性培養基，應在容器上用濃度小于100 cfu / ml的培養基分別接種微生物。

6.0縮寫

6.1 HCl：鹽酸
6.2 NaOH：氫氧化鈉
6.3 QC：質量控制
6.4 IPA：異丙醇
6.5 NCIM：G家工業微生物集合
6.6部門：部門
6.7 SOP：標準操作程序